人類原巨核細胞型白血病細胞UT-7細胞(提供STR鑒定報告)
平臺編號:zl-057214
細胞信息:UT-7細胞
產品規格:1×10?cells/T25培養瓶
注意事項:僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產品信息以出庫為準)
(1)細胞描述:該細胞于1988年建系;源于一名64歲患有急性粒細胞白血病(AMLM7)的男性的骨髓;對多種細胞因子有反應。在本庫通過STR鑒定結果正確,其STR鑒定結果如下:Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:10,12;D18S51:14,17;D19S433:14,14.2;D21S11:31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:8;D8S1179:11,15;FGA:23;TH01:6,9;TPOX:10;vWA:14,18,19;
(2)規格:T25方瓶或1ml凍存管
(3)細胞數量:1×10^6
(4)組織來源:人類原巨核細胞型白血病
(5)生長方式:懸浮生長
(6)細胞形態:淋巴母細胞樣
(7)培養液:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
(8)培養條件:37℃,5%CO2
(9)運輸方式:常溫運輸(T25方瓶)或干冰運輸(凍存管)
細胞處理:
1)凍存細胞的復蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2.1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。
3.將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。
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